人操人-91片黄在线观看-在线视频一区二区三区-伊人欧美-91欧美激情一区二区三区成人-正在播放国产精品-国模大尺度视频-浮力影院国产第一页-91手机视频-在线免费观看污-亚洲男人网站-国产99免费视频-久久涩综合-日韩精品一区二区三区视频-黑人黄色大片

服務咨詢熱線:

021-66030766

TECHNICAL ARTICLES

技術文章

當前位置:首頁技術文章PCR新手指南:快速PCR技術與快速PCR儀的區別

PCR新手指南:快速PCR技術與快速PCR儀的區別

更新時間:2015-05-06點擊次數:2329

在PCR儀上完成一個PCR反應所需要的時間決定于以下幾個因素:
1、模塊升溫和降溫時間
2、模塊與PCR管內溫度平衡時間
3、延伸時間
4、循環次數
下面就以上幾點做一點分析,以便大家了解快速PCR技術與快速PCR儀的區別。

1、模塊升溫和降溫度時間
PCR儀一般會標明升溫速度和降溫速度,但標的大多是zui大變溫速度,也就是說是瞬間達到的速度。而與實驗相關的平均升降溫速度只有極少量廠家標明。以平均2度和4度(能做到平均升降溫4度的儀器極少)來計算,從95度降到55度,分別是20秒和10秒,每一個循環差20秒鐘。以一般35個循環來計算,影響實驗時間700秒,也就是不到12分鐘。實際還要考慮過沖問題,影響時間還會少些。

2、模塊與PCR管內溫度平衡時間
模塊溫度達到后,PCR管內的溫度遠沒有達到(塑料和水的導熱系數比鋁塊差300倍以上),需要時間來使二者達到平衡。一般有四種辦法來減少這一時間,一是讓模塊溫度過沖,在管內溫度快達到時降到目標溫度,但太高的過沖可能造成實際溫度過沖,影響PCR反應結果;二是減少PCR反應液的體積,但體積變小時PCR反應的可靠性會降低;三是降低PCR管的厚度,但太薄時強度不夠;四是增加PCR管與模塊貼附程度。

3、延伸時間
延伸時間與PCR產物的長度和DNA聚合酶的合成速度有關。如果PCR產物長度少于100bp時,可能考慮將延伸時間變為0(即兩步法);采用高速的DNA聚合酶也是常用的方法,但并不是所有PCR實驗都可以用高速的DNA聚合酶。

4、循環次數
循環次數與模板量及檢測要求相關。

所謂快速PCR技術是將快速PCR儀與超薄管(或特殊貼附技術)以及高速DNA聚合酶等技術整合在一起,可達到較短時間完成PCR反應。而一些廠家在向用戶推銷PCR儀時,不去說明快速PCR技術,只強調PCR儀速度快(大都用zui大升降溫速度來HuYou用戶)。好像買了快速PCR儀后,原來1個半小時的擴增時間變會縮短成半小時似的。而用戶采購了快速PCR儀后才發現并不那么回事。有不少用戶采用快速模式根本就做不出好的實驗結果。特別是進行多重PCR擴增的用戶,如*系統用于身份鑒定的試劑。

快速PCR技術與快速PCR儀是兩回事??焖貾CR儀zui多只能縮短PCR反應時間10分鐘左右,要實現真正的快速PCR反應,還需要其他一些努力。大多數用戶根本就不需要快速PCR技術。

上一個:影響蠕動泵泵管性能的十個因素

返回列表

下一個:磁力攪拌器的工作原理及作用

主站蜘蛛池模板: 亚洲看片网站 | 香港三级日本三级韩国三级 | 亚洲综合成人av | 中文在线а√天堂 | 久久久久久久久99精品 | 天天添天天操 | av av片在线看 | 浪荡奴双性跪着伺候 | 第一av| 久久国产精品一区二区 | 国产免费二区 | 国产女人高潮视频 | 你懂的国产 | 欧美精品二区三区四区免费看视频 | 亚洲一区久久久 | 小柔的裸露日记h | 亚洲春色一区二区三区 | 国产精品久久久久久久久久久久久久久久久 | 日本香蕉网 | 中文无码日韩欧 | 天天干天天操天天爽 | 欧美日韩人妻精品一区二区三区 | 在线观看视频一区二区 | 爱爱免费网址 | 中文字幕国产在线观看 | 怡春院视频 | 福利小视频在线 | 日韩在线导航 | 国产乱轮视频 | 欧美成人图区 | 白白色在线播放 | 欧美一级大黄 | 国产二区一区 | 97人人艹 | 婷婷射| 日本大胆人体视频 | 男生插女生的网站 | 久久婷婷成人综合色 | 精品人妻无码中文字幕18禁 | 亚洲天堂免费 | 天天伊人网 | 日日夜夜免费精品 | 日韩高清在线 | 特黄级| 国产伦理久久精品久久久久 | 欧美第二页| 日本护士╳╳╳hd少妇 | 黄色一区二区三区 | 欧美精品色| 欧美日韩一区不卡 | h视频在线观看网站 | 九月婷婷丁香 | 91搞搞| 亚洲午夜av久久乱码 | 五月深爱婷婷 | 日本精品在线观看视频 | 91成人天堂久久成人 | 久久久久国产精品无码免费看 | 奶妈的诱惑 | 久久久在线免费观看 | 推特裸体gay猛交gay | 日韩小视频在线观看 | 三级影片在线播放 | 一区二区三区免费观看视频 | 亚洲一区二区电影网 | 中文字幕在线一区二区三区 | 免费看黄网站在线 | 五月天社区 | 69福利区| 爱爱免费视频 | 色草在线| 影音先锋三级 | 狠狠干干干| 91视频直接看 | 中文字幕乱码在线 | 91美女精品网站 | aaa日韩| 亚洲永久精品在线观看 | av手机在线观看 | 青青草成人免费 | 色玖玖| 99色播| 欧美专区第二页 | 色诱av | 欧美人妖xxxx | 日本免费一区二区三区四区 | 97人人干| 激情影院内射美女 | 青青精品 | 成人做爰www免费看视频网站 | 国产一区二区欧美 | 青青草在线免费 | 黄色99| 日日夜夜天天综合 | 人人澡人人澡人人 | 亚洲色图视频在线观看 | 神马久久av | 男女爱爱福利视频 | 美女扒开尿口给男人桶 |